ערכת ELISA לבדיקת נוגדנים אנטי-מחזוריים של פפטיד ציטרוליני (CCP)

ערכה זו מזהה נוגדנים אנטי-ציקליים של פפטיד ציטרוליני (נוגדני CCP) בדגימות סרום אנושיות על סמך השיטה העקיפה, כאשר אנטיגנים מטוהרים של פפטיד ציטרוליני ציטרולי משמשים כאנטיגן הציפוי.

תהליך הבדיקה מתחיל בהוספת דגימת הסרום לבורות תגובה שצופו מראש באנטיגנים המטוהרים שהוזכרו לעיל, ולאחר מכן תקופת דגירה. במהלך דגירה זו, אם קיימים נוגדני CCP בדגימה, הם יזהו וייקשרו באופן ספציפי לאנטיגנים של פפטיד ציטרוליני מחזורי המצופים על המיקרו-בורות, וייצרו קומפלקסים יציבים של אנטיגן-נוגדן. כדי להבטיח את דיוק השלבים הבאים, רכיבים לא קשורים בבורות התגובה מוסרים באמצעות תהליך שטיפה, המסייע בביטול הפרעות פוטנציאליות מחומרים אחרים בסרום.

לאחר מכן, מוסיפים צמדים של אנזימים לבורות התגובה. לאחר דגירה שנייה, צמדים אלה של אנזימים יתחברו באופן ספציפי לקומפלקסים הקיימים של אנטיגן-נוגדן, ויצרו קומפלקס חיסוני גדול יותר הכולל את האנטיגן, הנוגדן וצמד האנזים. כאשר תמיסת סובסטרט TMB מוכנסת למערכת, האנזים שבצמד מזרז תגובה כימית עם סובסטרט TMB, וכתוצאה מכך נוצר שינוי צבע נראה לעין. עוצמת תגובת הצבע הזו קשורה ישירות לכמות נוגדני ה-CCP הקיימים בדגימת הסרום המקורית. לבסוף, משתמשים בקורא מיקרופלטות למדידת הספיגה (ערך A) של תערובת התגובה. על ידי ניתוח ערך ספיגה זה, ניתן לקבוע במדויק את רמת נוגדני ה-CCP בדגימה, ולספק בסיס אמין לבדיקות קליניות ואבחון רלוונטיים.